近年來(lái)經(jīng)濟(jì)發(fā)展迅猛，人民生活水平逐年提高，對(duì)自身及家人特別是下一代的身體健康愈來(lái)愈重視。另外，由于國(guó)內(nèi)計(jì)劃生育工作逐步走向深化，獨(dú)生子女比較高，孩子的身體素質(zhì)更成為長(zhǎng)輩們關(guān)注的焦點(diǎn)。因此，怎樣提高新生兒質(zhì)量改善人類遺傳素質(zhì)，即優(yōu)生優(yōu)充已顯得非常重要。優(yōu)生優(yōu)育的個(gè)體出生。①避免有嚴(yán)重遺傳性疾病和先天性疾病的個(gè)體出生。②增進(jìn)體力、智力個(gè)體的繁衍。其中避免有嚴(yán)重遺傳性疾病及先天性疾病個(gè)體出生是優(yōu)生優(yōu)育zui基本的內(nèi)容。從臨床優(yōu)生學(xué)角度分析具體工作包括在母親妊娠期間對(duì)母親及胎兒進(jìn)行遺傳學(xué)檢查盡量排除常見(jiàn)的遺傳性疾病個(gè)體的出生，另外在妊娠是期檢查母親是否患有某些易引起胎兒畸型的傳染性疾病如弓型蟲(chóng)、風(fēng)疹病毒、衣原體等感染。以往對(duì)遺傳性疾病的檢測(cè)主要使用染色體分析法，而臨床絕大部分遺傳性疾病是基因病而不是染色體病，染色體發(fā)析法不能檢出的。若使用PCR基因擴(kuò)增法聯(lián)合單鏈構(gòu)型多態(tài)性分析（sscp）、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析（RFCP）等位基因特異性寡核某酸（Aso）點(diǎn)雜交或差異PCR可以很方便地檢出單個(gè)基因的突變而且其準(zhǔn)確性可達(dá)95%以上，因此使這一問(wèn)題得到了較好的解決。常見(jiàn)的易致胎兒畸型的感染性疾病原體主要有單皰病毒（HSVⅡ）、風(fēng)疹病毒（RV）、人巨細(xì)胞病毒（HCMV）、弓形體（TOX）及沙眼衣原體（CT）。以往這些病原體感染診斷比較困難，主要靠培養(yǎng)法進(jìn)行確診，而培養(yǎng)法費(fèi)時(shí)，代價(jià)昂貴，而且受到采樣、樣要保存及用藥等因素的影響，基本不能在臨床中推廣。PCR基因擴(kuò)增法因其高敏感性、高特異性非常適合這些疾病診斷及療效跟蹤，是zui值得推薦的檢驗(yàn)方法。

　　一、PCR基因擴(kuò)增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用，遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機(jī)體某一功能或缺陷或異常所致的疾病，其根本變化在于遺傳物質(zhì)。其類型包括單基因遺傳病，染色體遺傳病及多基因遺傳病。遺傳病診斷除詢問(wèn)病史，一般物理診斷，普通實(shí)驗(yàn)室檢查及了解癥狀、體征外有特殊性。過(guò)去常應(yīng)用系譜分析，染色體及性染色色質(zhì)檢驗(yàn)作為遺傳病診斷的主要依據(jù)，再輔以相關(guān)的酶學(xué)分析從而作出診斷。隨著分子生物不的迅速發(fā)展及其在遺傳性病診斷中的廣泛應(yīng)用，基因診斷技術(shù)誕生，基因診斷技術(shù)為遺傳病的臨床診斷起了很大的促進(jìn)作用。聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)是基因診斷主要技術(shù)之一。這種快速、靈敏的基因體外擴(kuò)增技術(shù)與多種分子生物學(xué)手段相配合可以檢出大部分已知的基因突變、基因缺失、染色體錯(cuò)位等，PCR技術(shù)日益成為遺傳病診斷的zui有效、zui可靠的方法之一。以下舉幾個(gè)在國(guó)內(nèi)有普遍意義的例子。

　　（一）、PCR檢測(cè)地中海貧血;地中海貧血（Thalassemia）是一種遺傳性慢性溶血性貧血病，是世界上zui常見(jiàn)且發(fā)病北zui高的一種單基因遺傳病。在兩廣、貴州、四川等地發(fā)病率較高，在廣西等地高達(dá)15%。地中海貧血是由于基因突變?cè)斐芍榈鞍椎牟黄胶猓菇Y(jié)構(gòu)正常的肽鏈合成量減少甚至沒(méi)有合成表現(xiàn)為溶血性貧血。接受累基因種類分為α、β、γ等，其中以 α、β地貧為zui常見(jiàn)，危害了zui大。珠蛋白基因簇位于人6號(hào)染色短臂上，有兩個(gè)重復(fù)基因基因位于α1、α2、兩個(gè)α基因及其旁側(cè)序列有很大的同源性，易出現(xiàn)染色體不等交換，導(dǎo)致α基因缺失-α地貧。α地貧基因部分缺失有α1基因部分缺失、α2基因缺失、α1及α2基因同時(shí)缺失及非缺失型地貧。可以應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增α1、α2基因從而檢測(cè)這些基因是否缺失、突變等，從而對(duì)α型地中海貧血作出診斷。β地中海貧血基因缺陷主要表現(xiàn)為基因序列中單一核苷酸的突變，或少數(shù)堿基的缺失、插入，使正常β珠蛋白肽鏈合成減注或缺失。應(yīng)用位點(diǎn)特異性寡核苷探針（Aso）進(jìn)行PCR產(chǎn)物斑點(diǎn)雜交即可對(duì)其作出診斷。

　　（二）、血友病，血友病是一組zui為常見(jiàn)的遺傳性凝血障礙，根據(jù)因子缺陷的不同分為甲、乙兩型，（Ⅷ、Ⅸ因子缺陷），也有復(fù)合型血友病，但不常見(jiàn)。甲型血友病發(fā)病率為1/10000，Ⅷ因子基因位于G6PD基因附近，全長(zhǎng)186Kb，大范圍的基因重排（缺失、插入、重復(fù)）導(dǎo)致甲型血友病的病例很少，僅為Ⅷ因子缺陷的5%，大部分病人表現(xiàn)為單個(gè)或少數(shù)堿基的突變。由于Ⅷ因子基因長(zhǎng)度為186Kb，突變位點(diǎn)多，而且新生突變頻率高，從臨床角度講不能對(duì)每一個(gè)突變都檢測(cè)，可對(duì)zui為常見(jiàn)的幾種突變類型進(jìn)行檢測(cè)，主要的檢測(cè)手段是PCR結(jié)合RELP分析。乙型血友病發(fā)病率占血友病的20%，其基因變化及檢測(cè)方法與甲型血友病類似。

　　（三）、苯丙酮尿癥，苯西酮尿證（PKU）是一種常染色體隱性遺傳病，患者因苯丙酸羥化酶轉(zhuǎn)化為酷氨酸，使苯氨酸及其代謝物在體內(nèi)大量蓄積，出現(xiàn)腦組損傷及不可逆性智力發(fā)育障礙。PKU患者出生時(shí)正常，新生兒一經(jīng)確診為PKU停止母乳喂養(yǎng)采用低苯丙氨酸欽食療法8—10年，可使患者智力水平發(fā)展維持正常。由于低苯丙氨酸欽食非常昂貴，一般家庭難以承受，因此，施行產(chǎn)前診斷，防止患兒出生是的選擇。PAH只在肝細(xì)胞中表達(dá)，不能用血細(xì)胞，成纖維細(xì)胞、羊水、絨毛細(xì)胞進(jìn)行酶活性分析，只能進(jìn)行基因診斷。PKU的基因變化并非全部PAH基因的缺失，而是以點(diǎn)突變?yōu)橹饕憩F(xiàn)形式，而且其突變位點(diǎn)很多。必須使用PCR擴(kuò)增結(jié)合，ASO，SSCP或使用擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析（AmpFLA）進(jìn)行檢測(cè)，這些技術(shù)都較復(fù)雜，檢驗(yàn)人員須經(jīng)專業(yè)培訓(xùn)。

　　（四）、脆—X綜合征，脆—X綜合片（fragile-X Syndrome,Frax）是發(fā)病率zui高的一種X-連鎖的智力低下綜合征（X-linked mental retardation XLMR）。因這種綜合征與X染色體上的脆位點(diǎn)連鎖而得名。大多數(shù)FRAX男性智商（IQ）低于50，并有隨著年齡增長(zhǎng)而下降的趨勢(shì)。用人工酵母染色體（artificial yeast chromosome,YAC）克隆技術(shù)分離獲得覆蓋X-脆位點(diǎn)區(qū)域的YAC克隆，在這一克隆中獲得一個(gè)能在人腦中表達(dá)的基因命名為FMR-1（fragile X mentai retardation-1）,FMR-1的5‘端有一個(gè)CGG（精）三核苷酸串（CGG）n,正常人群中（CGG）n中存在多態(tài)性，重復(fù)序列為6-46個(gè)，當(dāng)重復(fù)超過(guò)52個(gè)時(shí)，此區(qū)域的分裂呈不穩(wěn)定，導(dǎo)致重復(fù)序列大幅度增加，無(wú)臨床表現(xiàn)的攜帶者插入片段長(zhǎng)度小于500bg，有臨床表現(xiàn)者，長(zhǎng)度都大于600BP而且伴有甲基化。人們將500bp作為前突變與全突變的分界線。對(duì)Frax的診斷以前用細(xì)胞遺傳學(xué)的方法檢測(cè)脆位點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)條件嚴(yán)格，成功率不高。現(xiàn)在采用分子遺傳學(xué)方法即可診出前突變及全突變。用PCR擴(kuò)增CGG重復(fù)序列，檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的長(zhǎng)度。突變基因的擴(kuò)增片段增大，體細(xì)胞異質(zhì)性時(shí)出現(xiàn)多條長(zhǎng)度不等的擴(kuò)增帶甚至拖尾成一片，或者因?yàn)閿U(kuò)充的全突變插入片段過(guò)長(zhǎng)超出PCR擴(kuò)增能力而結(jié)果無(wú)擴(kuò)增現(xiàn)象。

　　（五）、性別發(fā)育異常，區(qū)別雄性及雌性的物質(zhì)基礎(chǔ)是性染色體，哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育中，雌性表型不需要任何調(diào)節(jié)，而雄性表型則由多因素決定，位于Y染色體上的指導(dǎo)雄性性別分化的基因命名為睪丸決定因子（TDF）。現(xiàn)代研究表明，SRY（Sex-determining region of Y chromosome）基因是TDF基因，位于Y染以體短臂末端。SRY區(qū)缺失易導(dǎo)致46XY核型個(gè)體發(fā)育成女性。進(jìn)行基因檢測(cè)可以檢出SRY基因組的易位及缺失，從而診斷性別發(fā)育異常，這一探索性別異常的研究非常熱門(mén)。另外還有一種46XY核型異常的病人即睪丸女性化，這是用于雄激素受體（androgen receptor,AR）基因缺欠，使雄激素的靶基因?qū)π奂に夭粦?yīng)答就答或不全而引起的，根據(jù)病情的不同有不同的表型，AR缺陷有很高的新生突變頻率，表現(xiàn)為無(wú)家族史的散發(fā)病。AR基因長(zhǎng)90Kb，位于X染色體上，AR基因異常大部分為個(gè)別基因堿基的突變，可以通過(guò)PCR結(jié)合ASO或SSCP檢出。

　　（六）、其它遺傳性疾病如抗胰蛋白酶缺陷癥，馬凡綜合征等等都可用PCR法進(jìn)行檢測(cè)讀者可以參閱有關(guān)文獻(xiàn)，進(jìn)一步了解。